2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye)

基本信息‌

‌中文名称‌：2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye)

货号：P-PR1267

规格：1ml、10ml

‌英文名称‌：2×RAPA HiFi PCR Mix (with Dye)
作用机制：含高保真DNA聚合酶（3'→5'外切酶活性），可精准扩增DNA片段，降低突变率；预混dNTPs、染料与优化缓冲液，染料可直接用于电泳分析，无需额外添加；2×浓度简化实验操作，适合高保真扩增需求。 

适用样本：基因克隆、载体构建、突变体筛选、测序模板扩增
产品概述

这是一款含染料的高保真PCR预混液，以高保真DNA聚合酶为基础，加入增强延伸结构，兼具超保真性能、快速延伸能力与长片段扩增优势，适配载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成等对保真性要求高的实验场景。

产品组成

主要包含高保真DNA聚合酶、dNTPs、优化的反应缓冲液、Mg²⁺、溴酚蓝染料等成分，无需额外添加Loading Buffer即可直接电泳。

产品特点

·超保真扩增：保真性能约为普通Taq酶的280倍，大幅降低PCR扩增过程中的碱基错配率

·快速延伸：延伸速度可达6kb/min，缩短实验周期

·长片段扩增：可有效扩增20kb的质粒/λDNA、8kb的基因组DNA、8kb的cDNA

·便捷电泳：预混溴酚蓝染料，扩增产物可直接点样电泳

·平末端产物：兼具5’-3’聚合酶活性与强3’-5’外切酶活性，扩增产物为平末端

操作步骤

.配制反应体系：按下表混合各组分（以25μl体系为例）

组分 体积

2XRAPA HiFi PCR Mix 12.5μl

上游引物（10μM） 1μl

下游引物（10μM） 1μl

模板DNA 1-5μl

ddH₂O 补至25μl

.

.PCR扩增：设置循环参数

·片段＜5kb：95℃预变性3min；95℃变性15s，55-65℃退火15s，72℃延伸（15s/kb），30-35个循环；72℃终延伸5min

·片段＞5kb：95℃预变性3min；95℃变性15s，55-65℃退火15s，72℃延伸（2-3min/kb），30-35个循环；72℃终延伸10min

.电泳检测：取5μl扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果

注意事项

·模板GC含量＞65%时，需添加5×Q-Solution以提升扩增效果

·扩增片段＜1kb时，延伸时间可直接设置为15s；片段＞5kb时，按2-3kb/min的速度设置延伸时间

·推荐使用25μl体系进行PCR扩增，不同PCR管导热性能差异可能影响扩增产量

·长期储存置于-20℃，可保存2年；短期使用可置于4℃（3个月），避免反复冻融

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