本试剂盒基于特异性双抗体夹心ELISA原理，固相酶标板包被抗大鼠MCP-4单克隆抗体，加入标准品及待测大鼠样本后，样本中的MCP-4抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质，加入酶标记的MCP-4多克隆抗体形成免疫复合物，再次洗涤后加入显色底物进行显色反应，终止后测定各孔吸光度值，显色强度与MCP-4浓度成正比，依据标准曲线可精准定量大鼠样本中MCP-4水平。
基本参数：
产品名称：大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒
英文名称：MCP-4 ELISA Kit
货号：Y-E1130
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤2.0pg/mL
检测范围：5.0pg/mL - 180pg/mL
反应时间：总反应时长100分钟（温育70分钟、显色30分钟）
保存条件：2-8℃避光保存，浓缩显色液需单独密封存放
有效期：未开封12个月，开盖后20天内使用完毕
显色系统：稳定型TMB底物显色体系，显色稳定、不易褪色
检测波长：450nm单波长定量检测
标准曲线绘制：多梯度标准品检测，四参数回归拟合标准曲线，精准定量
特异性：特异性识别大鼠MCP-4，与其他趋化因子无交叉反应
重复性：板内CV≤8%，板间CV≤11%
注意事项：样本避免反复冻融，会造成蛋白失活；温育全程保持微孔板水平放置，避免液体偏移。
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒试剂室温平衡 22min，浓缩洗涤液 1:19 稀释，大鼠血清样本室温融化，去除脂质漂浮层。
酶标板每孔加 100μL 标准品、血清样本、空白缓冲液。
酶标二抗工作液 100μL 加入各孔，密封 37℃孵育 85min。
加满洗涤液浸泡 38s，洗涤 4 次，拍干微孔。
避光 TMB 显色液 100μL，37℃避光显色 17min。
加入终止液充分混匀微孔。
读取 450nmOD 值，换算 MCP-4 蛋白浓度。
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