大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA原理，酶标板固定大鼠抵抗素特异性捕获抗体，加入标准品与待测大鼠生物样本，样本中的抵抗素抗原与固相抗体特异性结合，洗板清除未结合杂质，加入HRP标记的抵抗素检测抗体，形成特异性免疫复合物，经充分洗涤后加入显色底物显色，显色深浅与样本抵抗素含量呈正相关，终止反应后检测吸光度，结合标准曲线完成定量分析。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒

英文名称：rat Resistin ELISA Kit
货号：Y-E1596

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.9ng/mL

检测范围：1.8ng/mL - 70ng/mL

反应时间：总反应时长90分钟（温育60分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光密封保存，禁止冻融试剂

有效期：原装试剂盒12个月有效期

显色系统：经典TMB双组分显色系统，显色均匀稳定

检测波长：450nm/630nm双波长检测

标准曲线绘制：梯度标准品OD值拟合四参数标准曲线，精准定量

特异性：特异性识别大鼠抵抗素，与脂联素、瘦素等脂肪因子无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：血清样本需清澈，脂血会干扰检测；温育温度严格37℃，保证抗原抗体结合效率。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温平衡 24min，洗涤液 1:21 稀释，大鼠脂肪组织上清低温分装保存。

各微孔添加 100μL 抵抗素标准品、脂肪上清、空白稀释液。

酶标记特异性抗体 100μL 每孔，封板 37℃孵育 58min。

洗涤浸泡 28s，洗 3 次，吸干水分。

避光 TMB 显色液 100μL，37℃孵育 13min。

终止液混匀微孔液体。

读取 OD450，定量大鼠抵抗素浓度。
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