双抗体夹心 ELISA 法,微孔板包被抗大鼠 BACE2 捕获抗体,样本裂解液中 BACE2 蛋白酶结合固相抗体,洗板去除杂蛋白后加入 HRP 标记抗 BACE2 检测抗体形成夹心复合物,TMB 显色测吸光度,标准曲线定量 BACE2 蛋白水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1040 |
英文名称 | BACE2 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤1.5pg/mL
检测范围:4pg/mL - 1300pg/mL
反应时间:总反应时长180分钟(90分钟温育+30分钟二抗结合+30分钟显色)
保存条件:2-8℃避光冷藏,酶蛋白试剂密封防潮
有效期:未开封试剂盒12个月
显色系统:高灵敏TMB显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:标准品梯度OD值四参数拟合曲线,定量BACE2含量
特异性:特异性识别大鼠BACE2,与BACE1无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:脑组织样本充分裂解,去除杂质;全程低温避光操作,避免酶蛋白失活。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温放置 30min,洗涤液稀释,全程避光防止酶蛋白失活。
标准品制备:BACE2 冻干标准品轻柔溶解,7 组梯度稀释,空白对照孔设置。
加样:标准孔 50μL 标准品,脑组织蛋白裂解样本 50μL 加入检测孔。
酶标抗体孵育:每孔 50μL HRP-BACE2 抗体,密封 37℃避光孵育 74min。
洗板流程:洗涤液浸泡 43s,彻底拍干,重复洗板 6 次。
底物显色:TMB 底物 A、B 各 50μL,37℃避光显色 23min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 测 OD 值,计算 BACE2 蛋白表达量。
关键字: 大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2;BACE2;ELISA试剂盒;
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