本试剂盒采用竞争性ELISA检测原理,将AZT人工抗原包被于酶标板微孔,封闭后加入待测大鼠样本、AZT标准品及定量酶标抗体,样本中的AZT与固相包被AZT抗原竞争结合有限的特异性抗体,样本中AZT浓度越高,结合固相的酶标抗体越少,洗板去除未结合物质后加入底物显色,终止反应后测定吸光度,吸光度与AZT含量负相关,通过标准曲线计算样本中AZT浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒
英文名称:AZT ELISA Kit
货号:Y-E1240
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤5.0ng/mL
检测范围:10ng/mL - 500ng/mL
反应时间:总反应时长85分钟(抗原结合55分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光保存,小分子检测试剂防潮存放
有效期:未开封12个月,开封后20天内使用
显色系统:小分子专属TMB显色体系,抗干扰性强
检测波长:450nm单波长定量检测
标准曲线绘制:线性拟合标准曲线,适配小分子药物定量检测
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤11%
特异性:特异性识别AZT小分子药物,与其他核苷类药物无交叉反应
注意事项:样本稀释比例需精准,小分子浓度偏差影响大;避免试剂接触有机溶剂。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 21min,洗涤缓冲液 1:17 稀释,大鼠药物处理血浆样本避光保存。
微孔板设置 AZT 梯度标准孔、血浆样本孔、空白对照孔,每孔 100μL 液体。
酶标记抗原工作液 100μL / 孔,覆膜 37℃孵育 48min。
洗涤浸泡 22s,洗涤 3 次,吸干微孔水分。
避光显色液 100μL,37℃孵育 11min。
终止液 50μL 混匀微孔内液体。
酶标仪 450nm 测 OD,定量大鼠血浆 AZT 药物浓度。
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关键字: 大鼠叠氮胸苷;AZT;ELISA试剂盒;
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