本试剂盒采用竞争ELISA检测原理，将DA抗原包被于酶标板微孔，封闭非特异性位点后，加入标准品、待测大鼠脑组织及体液样本和DA特异性抗体，样本中的DA与固相DA抗原竞争结合抗体，DA含量越高，固相结合抗体量越少，洗板后加入酶标记二抗孵育，再次洗涤后底物显色，终止后测定吸光度，吸光度与DA浓度负相关，通过标准曲线计算样本DA含量。
基本参数：
产品名称：大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒
英文名称：DA ELISA Kit
货号：Y-E1241
规格：48T/96T
检测范围：5.0pg/mL - 180pg/mL
反应时间：总反应时长90分钟（温育60分钟、显色30分钟）
保存条件：2-8℃避光密封保存，神经递质试剂防潮避光
有效期：原装试剂盒12个月有效期
显色系统：神经递质专属TMB显色体系，背景值极低
检测波长：450nm/630nm双波长检测
标准曲线绘制：四参数Logistic拟合标准曲线，R²≥0.993
特异性：特异性识别大鼠多巴胺，与去甲肾上腺素、5-羟色胺无交叉反应
重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%
注意事项：样本采集后避光保存，多巴胺易氧化降解；避免溶血、脂血样本干扰。
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒试剂室温平衡 25min，洗涤液 1:20 稀释，大鼠脑纹状体匀浆避光冰浴，防止单胺氧化降解多巴胺。
微孔板分孔添加 100μL DA 梯度标准品、脑组织上清、空白稀释液。
一步法酶抗体液 100μL 每孔，封板 37℃孵育 64min。
洗涤浸泡 29s，洗 4 次，吸干水分。
避光显色液 100μL，37℃孵育 13min。
终止液混匀微孔，终止显色反应。
酶标仪测 OD450，计算大鼠脑组织多巴胺 DA 含量。
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