本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理,酶标板微孔包被大鼠D1R特异性捕获抗体,加入标准品和待测大鼠神经组织样本,样本中的D1R抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合杂质,加入酶标记的D1R检测抗体,形成特异性免疫夹心复合物,充分洗涤后加入TMB底物显色,显色深浅与D1R含量成正比,终止反应后检测OD值,对照标准曲线实现定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒
英文名称:D1R ELISA Kit
货号:Y-E1155
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.8ng/mL
检测范围:1.5ng/mL - 52ng/mL
反应时间:总反应时长100分钟(受体孵育70分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光保存,受体抗体组分单独密封
有效期:未开封12个月,开封后30天内有效
显色系统:高灵敏度TMB显色体系,适配神经受体检测
检测波长:450nm单波长定量检测
标准曲线绘制:梯度标准品OD值拟合四参数标准曲线
特异性:特异性结合大鼠D1R,与D2R等多巴胺受体无交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:脑组织样本低温裂解,保证受体完整性;温育温度恒定,避免结合效率波动。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 33min,洗涤缓冲液 1:24 稀释,大鼠细胞膜裂解上清低温避光操作。
酶标板各微孔加入 100μL D1R 标准蛋白、膜上清、空白缓冲液。
酶偶联二抗 100μL / 孔,覆膜 37℃孵育 86min。
洗涤浸泡 41s,洗涤 5 次,垂直拍干微孔残留洗液。
避光 TMB 显色底物 100μL,室温显色 21min。
硫酸终止液中和显色体系,摇匀微孔。
450nm 读取 OD 值,定量 D1 受体表达量。
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