本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法,固相载体包被纯化的大鼠D2R特异性抗体,加入梯度标准品和待测大鼠样本,样本中的D2R抗原被固相抗体特异性捕获,洗板去除游离成分,加入辣根过氧化物酶标记的D2R检测抗体,形成稳定的免疫复合物,洗涤后进行底物显色反应,终止显色后测定吸光度,依据标准曲线精准定量样本中D2R的表达水平。
基本参数:

产品名称:大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒
英文名称:D2R ELISA Kit
货号:Y-E1091
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.7ng/mL
检测范围:1.3ng/mL - 50ng/mL
反应时间:总反应时长105分钟(孵育75分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光密封保存,禁止冷冻试剂
有效期:原装试剂盒12个月
显色系统:优化型TMB显色体系,显色稳定、误差小
检测波长:450nm/630nm双波长校正
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990
特异性:专一识别大鼠D2R蛋白,与其他多巴胺受体无交叉识别
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:样本避免反复冻融,防止受体蛋白变性;洗涤步骤轻柔,保护微孔包被层。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒组分室温静置 31min,洗涤液 1:26 稀释,大鼠中脑组织匀浆冰上避光处理。
微孔板设置梯度 D2R 标准孔、组织样本孔、空白孔,每孔 100μL 液体。
一步混合酶工作液 100μL 每孔,密封 37℃避光孵育 71min。
洗涤浸泡 35s,洗 4 次,吸干微孔水分。
避光显色液 100μL,37℃显色 15min。
终止液 50μL 混匀微孔液体。
检测 OD450,计算大鼠 D2 受体蛋白浓度。
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