大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板预先包被大鼠SP-A特异性捕获抗体，加入标准品和待测大鼠肺组织、肺泡灌洗液样本，样本中的SP-A抗原与固相抗体特异性结合，洗板除去未结合杂质，加入酶标记的SP-A检测抗体，形成夹心免疫复合物，再次洗板后加入TMB底物显色，终止后测定OD值，依据标准曲线精准定量样本中SP-A的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒

英文名称：SP-A ELISA Kit
货号：Y-E1235

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.15ng/mL，可精准捕捉大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中微量SP-A

检测范围：0.3ng/mL～25ng/mL，覆盖大鼠肺部炎症、肺损伤模型SP-A表达区间

反应时间：总实验时长120分钟，抗体孵育90分钟，底物显色30分钟，37℃恒温反应

保存条件：试剂盒整体2～8℃避光冷藏，浓缩试剂密封保存，防止挥发浓缩

有效期：未拆封有效期6个月，开盖后试剂1个月内使用完毕

显色系统：高灵敏TMB显色系统，显色稳定，梯度差异明显，适合微量蛋白检测

检测波长：450nm检测波长，630nm校正波长，消除微孔板底色干扰

标准曲线绘制：7梯度标准品浓度，四参数曲线拟合，R²≥0.992，线性拟合度良好

特异性：特异性结合大鼠SP-A蛋白，与SP-B、SP-C、SP-D等肺表面活性蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，高低浓度样本检测稳定性一致

注意事项：肺泡灌洗液样本需过滤除杂，避免杂质影响结合反应；实验全程避光操作，防止底物降解；洗涤液配比需精准，浓度过高会洗脱结合抗体；标准品现配现用，不可反复冻融。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温平衡 32min，洗涤缓冲液 1:25 稀释，大鼠支气管肺泡灌洗液过滤除杂质。

酶标板每孔添加 100μL SP-A 梯度标准品、灌洗液上清、空白缓冲液。

一步法酶抗体液 100μL / 孔，避光 37℃孵育 67min。

洗涤浸泡 30s，洗 4 次，吸干水分。

避光 TMB 显色底物 100μL，37℃孵育 14min。

终止液 50μL 混匀微孔，终止反应。

450nm 检测 OD，定量大鼠 SP-A 蛋白含量。
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