双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板包被抗大鼠 IL-12 P40 亚基特异性捕获抗体,样本游离 P40 亚基结合固相抗体,洗除杂蛋白后加入酶标记抗 P40 检测抗体形成夹心复合物,底物显色测 OD 值,定量 IL-12 P40 单体含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1540 |
英文名称 | IL-12/P40 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤2pg/mL
检测范围:4pg/mL - 320pg/mL
反应时间:样本孵育120分钟,二抗孵育60分钟,避光显色15分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏,试剂密封防潮,禁止冷冻
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:高灵敏度TMB显色体系
检测波长:450nm读取OD值
标准曲线绘制:标准品倍比稀释,检测对应吸光度,四参数拟合绘制标准曲线,计算P40亚基浓度
特异性:特异性识别大鼠IL-12 P40亚基,不与P70亚基及其他白介素交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:1. 避免样本反复冻融,保护蛋白活性;2. 洗板充分,消除非特异性吸附;3. 孵育温度恒定,保证反应一致性;4. 独立批次试剂单独使用。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温平衡 22min,20 倍洗涤液稀释混匀,底物避光保存。
标准品稀释:IL-12 P40 标准品溶解配置 6 组梯度,空白零孔。
样本上样:标准孔 50μL 标准液,树突状细胞上清样本 50μL 上样。
孵育反应:每孔 50μL HRP 标记 P40 亚基特异性抗体,封膜 37℃避光孵育 58min。
洗板:洗涤液浸泡 30s,拍干,洗板 5 次。
显色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃反应 14min。
终止检测:终止液混匀,7min 内 450nm 读数,计算 IL-12 P40 含量。
关键字: 大鼠白介素12;IL-12/P40;ELISA试剂盒;
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