双抗体夹心 ELISA 体系,固相微孔板固定抗大鼠 IL1Ra 捕获抗体,样本 IL1Ra 拮抗蛋白特异性结合固相抗体,洗板去除杂蛋白后加入 HRP 标记抗 IL1Ra 检测抗体形成夹心免疫复合物,底物显色读数,依据标准曲线定量 IL1Ra 含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1095 |
英文名称 | IL-1ra ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤1pg/mL
检测范围:2pg/mL - 210pg/mL
反应时间:孵育120分钟,二抗反应60分钟,避光显色15分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏,试剂密封存放,防止挥发、污染
有效期:原装未拆封有效期6个月
显色系统:TMB底物显色体系,硫酸终止液终止显色
检测波长:450nm检测吸光度
标准曲线绘制:梯度稀释IL1Ra标准品,检测OD值,四参数拟合绘制标准曲线,计算样本浓度
特异性:特异性结合大鼠IL1Ra,与IL-1α、IL-1β及其他拮抗剂蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:1. 样本避免反复冻融,保证蛋白活性;2. 洗板彻底,降低本底误差;3. 恒温孵育,保证反应稳定性;4. 不同批次试剂禁止混用。
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂平衡:全部试剂室温放置 28min,浓缩洗涤液 1:20 稀释混匀备用。
标准品配制:IL1Ra 冻干标准品充分溶解,梯度稀释 7 个浓度梯度。
加样:标准孔 50μL 标准品,炎症组织匀浆、细胞上清 50μL 加入检测孔。
酶抗体孵育:每孔 50μL HRP-IL1Ra 抗体,密封 37℃避光孵育 65min。
洗板:洗涤液浸泡 36s,拍干,洗板 6 次。
显色:底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 18min。
终止读数:终止液摇匀,9min 内 450nm 检测,计算 IL1Ra 含量。
关键字: 大鼠白介素1受体拮抗剂;IL1Ra;ELISA试剂盒;
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