本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理,固相酶标板微孔固定纯化的大鼠HL特异性抗体,加入梯度标准品和待测大鼠肝组织、血清样本,样本中的HL抗原与固相抗体特异性结合,洗板去除游离反应物,加入HRP标记的HL检测抗体,形成特异性免疫复合物,经洗涤后显色反应,显色深浅与HL含量成正比,终止后通过标准曲线完成定量分析。
基本参数:

产品名称:大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒
英文名称:HL ELISA Kit
货号:Y-E1112
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度0.1U/L,可精准检测大鼠肝脏、血清中HL活性含量
检测范围:0.2U/L~12U/L,覆盖大鼠脂肪肝、脂代谢异常模型HL浓度区间
反应时间:总时长95分钟,孵育65分钟,显色30分钟
保存条件:2~8℃避光冷藏,酶类试剂密封保存,防止失活
有效期:未开封有效期6个月,开封后30天内用完
显色系统:酶专用稳定TMB显色体系,抗酶活性干扰
检测波长:450nm主波长,570nm校正波长
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠肝脂酶,与脂蛋白脂酶无交叉反应
重复性:板内CV≤4%,板间CV≤6%
注意事项:样本避免高温处理,防止脂酶失活;实验全程低温操作;洗涤彻底,去除杂蛋白干扰;标准品现配现用。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 27min,洗涤缓冲液 1:23 稀释,大鼠肝组织匀浆全程冰上避光处理。
酶标板每孔添加 100μL HL 标准酶蛋白、肝上清、空白稀释液。
一步混合酶工作液 100μL 每孔,密封 37℃孵育 68min。
洗涤浸泡 31s,洗 4 次,吸干微孔残留液体。
避光 TMB 显色液 100μL,37℃孵育 13min。
终止液混匀微孔,终止显色反应。
450nm 测 OD,定量大鼠肝脂酶 HL 含量。
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