本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,微孔板包被大鼠VWF特异性捕获抗体,加入梯度标准品和待测大鼠样本后,样本中的VWF抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板去除游离杂质,加入酶标记VWF检测抗体,形成稳定的免疫夹心复合物,经底物酶促显色、终止反应后检测吸光度,OD值与样本中VWF含量正相关,结合标准曲线可精准定量血管性血友病因子的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒
英文名称:vWF ELISA Kit
货号:Y-E1308
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.05IU/mL,精准定量大鼠血浆VWF活性含量
检测范围:0.1IU/mL - 5IU/mL,适配大鼠凝血功能、血管损伤模型检测
反应时间:全流程实验耗时100分钟,蛋白结合反应充分,检测精准
保存条件:试剂盒2-8℃避光冷藏,严禁冷冻,防止蛋白变性
有效期:未开封试剂盒有效期6个月
特异性:特异性识别大鼠VWF,无血浆其他凝血因子交叉干扰
重复性:板内、板间变异系数均<8%
注意事项:血浆样本需无凝块、无溶血,否则会直接影响VWF活性检测结果。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 30min,截取酶标板条,对所有检测孔进行编号分类。
冻干标准品溶解稀释为梯度浓度,标准孔加 55μL 标品,大鼠抗凝血浆孔上样 55μL 样本,空白孔补稀释液。
每孔加入酶结合液 110μL,覆膜封板,37℃恒温孵育 62min。
洗板 4 次,洗涤液浸泡 26s / 次,倒置拍干微孔废液。
100μL 显色底物液加入微孔,避光 37℃显色 20min。
55μL 终止液终止显色反应,横向晃动酶标板。
酶标仪 450nm 读取 OD 值,计算 VWF 样本浓度。
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