本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测大鼠样本中STK的活性及含量。将纯化的大鼠STK特异性抗体包被于酶标板作为固相载体,加入待测样本与标准品,样本中的STK抗原与固相抗体特异性结合,洗涤后加入HRP标记的STK检测抗体,形成特异性免疫复合物,通过底物显色反应呈现特异性吸光值,吸光度高低与样本中STK含量正相关,借助标准曲线可精准定量大鼠STK水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1012 |
英文名称 | STK ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测值0.2U/L,可精准检测大鼠细胞、组织中微量STK酶活性含量。
检测范围:0.4U/L - 20U/L,适配大鼠血清、细胞裂解液、脏器组织样本检测。
反应时间:总实验时长120分钟,抗原抗体结合反应90分钟,显色反应30分钟。
保存条件:酶标板、抗体试剂2-8℃冷藏,酶底物液避光单独保存,禁止冻融。
有效期:原装未拆封有效期6个月,底物液开封后7天内用完。
特异性:特异性结合大鼠STK靶点,与其他蛋白激酶、磷酸酶无交叉反应,抗干扰能力强。
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤8.5%,酶活性检测数据稳定。
注意事项:避免样本中蛋白酶干扰,实验耗材需无菌无酶,显色反应需严格控制时间,避免过深或过浅影响读数。
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂盒室温回温 35min,按配比稀释洗涤液,梯度稀释 STK 标准品,拆分酶标板条,多余板条密封避光 2~8℃存放。
排布空白孔、标准品梯度孔、待测样本孔;标准品孔加标准溶液 50μL,样本孔上样待测样本 50μL,空白孔不加试剂。
除空白孔外每孔加入酶标记抗体工作液 100μL,封板膜封板,37℃恒温孵育 70min。
揭膜弃液,洗涤液加满每孔静置 40s 后拍干,连续洗板 6 次,彻底去除未结合杂质。
每孔分别添加显色 A、B 液各 50μL,轻微震荡混匀,37℃避光显色 20min。
每孔加注终止液 50μL,混匀终止酶促反应。
酶标仪 450nm 读取 OD 值,拟合标准曲线计算样本 STK 浓度。
关键字: 大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶;STK;ELISA试剂盒;
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