本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理,微孔板固相包被人丝氨酸蛋白酶(PRSS)特异性抗体,加入待测样本与标准品后,样本中的PRSS抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合物质,加入酶标记二抗形成夹心免疫复合物,酶促显色终止后检测吸光度,数值高低对应样本中PRSS的表达浓度,可精准定量样本靶标含量。
基本参数:

产品名称:人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒
英文名称:PRSS Elisa Kit
货号:Y-E953
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 3.3pg/mL
检测范围:19pg/mL ~ 920pg/mL
反应时间:样本孵育 65min,二抗温育 47min,底物显色 16min,合计 2h08min
保存条件:未拆封试剂盒 2-8℃避光,拆分板条装入密封袋加干燥剂冷藏,不可室温久放
显色系统:单组分 TMB 显色液,强酸终止液终止变色
检测波长:仅 450nm 波长检测 OD 值
标准曲线绘制:线性最小二乘法回归,8 个标准品梯度点
注意事项:蛋白酶极易自降解,样本采集后立即分装冻存;全程避免蛋白酶污染试剂
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒组分室温回温 25min,稀释浓缩洗涤液,梯度稀释 PRSS 标准品,取用实验酶标板。
标准品孔加入 50μL 梯度 PRSS 标准液;样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 样本;空白孔无加样。
检测孔加入酶标记抗 PRSS 抗体 100μL,封板 37℃孵育 57min。
弃液后洗涤液注满每孔静置 30s,甩干洗板 4 次,拍干微孔板。
显色双液各 50μL 混匀添加,避光显色 14min。
加入终止液 50μL 终止并混匀显色。
450nm 测 OD 值,拟合标准曲线计算 PRSS 浓度。
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