大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，检测大鼠脑组织及体液样本中的MBP含量。酶标板固相载体包被纯化的大鼠MBP特异性捕获抗体，加入待测样本与梯度标准品后，MBP抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板纯化体系后，加入HRP标记的MBP检测抗体形成免疫复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线可精准定量大鼠MBP的浓度水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，适配大鼠脑、脊髓神经组织中微量MBP蛋白检测。

检测范围：0.2ng/mL - 9ng/mL，覆盖神经损伤、脱髓鞘模型大鼠MBP表达浓度范围。

反应时间：全程90分钟，样本孵育60分钟，酶孵育20分钟，显色10分钟。

保存条件：全套试剂2-8℃冷藏避光，避免强光照射导致蛋白抗体失活。

有效期：原装未拆封有效期8个月，开封后密封保存20天内有效。

特异性：高度特异性识别大鼠MBP蛋白，神经组织杂蛋白无干扰，无交叉反应。

重复性：板内CV≤4.8%，板间CV≤6.2%，神经蛋白检测精度高。

注意事项：神经组织样本需低温研磨裂解，防止MBP降解，实验全程无菌无污染。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 30min，稀释浓缩洗涤液，配置系列浓度 MBP 标准品，拆分酶标板条，多余板条密封冷藏避光放置。

酶标板标记分组，标准品孔加入梯度标准溶液 50μL，样本孔加入预处理待测样本 50μL，空白孔不加液。

所有检测孔加入酶偶联抗体液 100μL，封板密封，37℃孵育 60min。

甩去孔内废液，洗涤液浸泡每孔 30s 后拍干，洗板 5 次。

加入显色 A、B 液各 50μL，轻柔混匀，37℃避光显色 16min。

加入终止液 50μL 混匀终止显色。

酶标仪 450nm 测 OD 值，计算样本 MBP 含量。