本试剂盒基于竞争ELISA检测原理,固相酶标板包被FT4特异性抗原,加入大鼠待测样本和酶标记FT4抗体,样本中的游离甲状腺素与固相抗原竞争结合酶标抗体,样本FT4含量与固相结合的酶标抗体量呈负相关,经洗涤、底物显色、终止反应后,检测吸光度值并拟合标准曲线,可精准定量大鼠样本中FT4的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒
英文名称:FT4 ELISA Kit
货号:Y-E1620
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.2pmol/L
检测范围:0.5pmol/L - 40pmol/L
反应时间:全程140分钟(样本孵育80min,酶标孵育30min,显色30min)
保存条件:2-8℃冷藏,试剂开封后密封防潮
有效期:未开封储存有效期12个月
特异性:特异性检测大鼠游离FT4,与TT4、FT3、TT3无交叉反应
重复性:板内变异系数CV≤5%,板间变异系数CV≤7%
注意事项:血清样本避免反复冻融;孵育湿度充足,防止孔液蒸发;标准曲线每次实验重新绘制
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 30min,稀释浓缩洗涤液,配制 FT4 系列标准品,酶标板标注各类检测微孔。
标准孔加入梯度游离甲状腺素标准品 50μL,待测孔加入 50μL 大鼠血清稀释样本,空白孔无添加。
全部检测孔加入一步法酶标记抗体工作液 100μL,覆膜封口,37℃恒温孵育 52min。
揭膜弃液,洗涤液加满每孔静置 40s 后甩干,循环洗板 5 次,拍干残液。
每孔依次加入显色液 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 15min。
加入终止液 50μL 终止显色,轻晃酶标板混匀。
酶标仪 450nm 测定吸光度,定量样本 FT4 浓度。
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