本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板微孔预先包被大鼠fPSA特异性捕获抗体,加入标准品与大鼠待测样本后,样本中的游离前列腺特异性抗原与固相抗体特异性结合,洗板纯化后加入酶标记fPSA检测抗体,形成稳定的免疫夹心复合物,底物显色后吸光度与样本中fPSA含量正相关,通过标准曲线可完成精准定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒
英文名称:fPSA ELISA Kit
货号:Y-E1355
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.08ng/mL
检测范围:0.2ng/mL - 10ng/mL
反应时间:全程160分钟(样本孵育100min,酶标孵育30min,显色30min)
保存条件:2-8℃避光密封保存,酶试剂单独冷藏
有效期:未开封储存有效期10个月
特异性:特异性结合大鼠游离PSA,与结合型PSA、其他蛋白酶无交叉反应
重复性:板内变异系数CV≤6%,板间变异系数CV≤8%
注意事项:样本无溶血、无脂血污染;温育过程禁止移动酶标板;显色时间精准把控
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 30min,配比洗涤缓冲液,梯度稀释 fPSA 标准品,酶标板分区标记实验组别。
标准品孔加入梯度游离前列腺特异性抗原标准品 50μL,样本孔加入 50μL 大鼠前列腺匀浆上清,空白孔不加液。
非空白孔加入一步法酶偶联物工作液 100μL,封板密封,37℃孵育 55min。
倾倒孔内废液,洗涤液浸泡 30s 甩干,洗板 4 次,彻底清洗微孔。
每孔加入显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 16min。
加入终止液 50μL 终止反应,水平摇晃混匀液体。
450nm 检测 OD 值,标准曲线换算 fPSA 含量。
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