大鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心酶联免疫检测原理，酶标板微孔内包被有纯化的大鼠omentin特异性捕获抗体。检测时，样本中的omentin抗原与固相捕获抗体特异性结合，洗去未结合杂质后，加入酶标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体夹心复合物。后续通过底物显色、终止反应，样本中omentin含量越高，显色反应产物浓度越高，吸光度数值越大，通过标准曲线回归计算，可精准定量大鼠样本中的omentin水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤1.5pg/mL

检测范围：3pg/mL - 120pg/mL

反应时间：总时长150分钟，三步温育依次为60分钟、40分钟、20分钟

保存条件：所有试剂2-8℃避光密封保存，禁止冷冻，洗涤液常温密封存放

有效期：未开封有效期10个月，开封后15天内用完

特异性：特异性针对大鼠网膜素，与脂联素、瘦素等脂肪细胞因子无交叉反应

重复性：板内CV≤4%，板间CV≤6%，检测精准度高

注意事项：样本避免反复冻融，否则会导致网膜素蛋白降解；加样需精准快速，减少孔内液体挥发；终止液加入顺序需统一，避免显色差异。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒所有试剂室温平衡 20min，配置梯度标准品，样本离心取上清稀释，空白孔加稀释液，每孔加样 45μL。

每孔加入酶标抗体 55μL，封板后 37℃恒温孵育 50min。

洗板液注满每孔，浸泡 35s 后倒掉，重复洗板 5 次，孔内无残留废液。

每孔加显色液 A 50μL、显色液 B 50μL，避光轻晃混匀，37℃显色 18min。

加入终止液 50μL 混匀终止反应。

酶标仪 450nm 读取 OD 值，3-5 分钟内完成检测。

标准曲线定量，核算稀释倍率，得出样本网膜素含量。