本试剂盒基于双抗体夹心免疫酶标原理，预先在酶标板微孔包被纯化的人再生基因蛋白IV特异性抗体，加入标准品和待测样本后，样本中的REG-4抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合成分，随后加入HRP标记的REG-4检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，显色反应后OD值与REG-4含量正相关，通过标准曲线即可定量检测样本中REG-4蛋白浓度。
基本参数：
产品名称：人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒
英文名称：REG-4 ELISA Kit
货号：Y-E2574
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.1ng/mL
检测范围：0.2ng/mL - 12.5ng/mL
反应时间：抗原捕获 40min，二抗结合 40min，显色 14min
保存条件：2-8℃避光保存，板条剩余部分连同干燥剂密封冷藏
显色系统：即用型 TMB 显色液，无需配比
检测波长：450nm 为主波长，650nm 参考
标准曲线绘制：设置空白对照孔，扣除本底后绘制标准曲线
注意事项：粪便提取样本需充分过滤杂质，防止微孔板堵孔
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 30min，梯度稀释 REG-4 标准品，细胞培养上清样本稀释，标注酶标板标准孔、样本孔、空白孔。
按规定体积加样，空白孔加稀释缓冲液，标准孔加不同浓度 REG-4 标准液，样本孔加入待测上清。
直接向全部微孔加入酶标抗体工作液，无需前置孵育洗板，轻板混匀液体。
封板密封后置于 37℃恒温箱避光孵育 65min，板体平放无挤压。
撕掉封板倒掉液体，洗板液加满微孔浸泡 30s，连续洗板 5 次并拍干。
避光加入显色底物，室温避光显色 16min，根据标准品显色梯度判断终止节点。
终止液终止显色，酶标仪 450nm 测 OD 值，换算得到样本 REG-4 蛋白浓度。
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