本试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术定量检测人样本中癌基因蛋白质p190/bcr-abl。微孔板固相载体包被p190/bcr-abl特异性捕获抗体,待测样本中的靶蛋白可与固相抗体特异性结合,洗板去除游离杂质后,加入HRP标记的对应检测抗体,形成固相抗体-靶蛋白-酶标抗体夹心复合物。后续加入TMB底物进行酶促显色,终止反应后检测450nm处吸光度,显色强度与样本中p190/bcr-abl蛋白浓度呈正相关,通过标准曲线拟合计算即可得到样本中靶蛋白的含量。
产品参数:
产品名称 | 人癌基因蛋白质p190/bcr-abl ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E296 |
英文名称 | Oncogene Protein p190/bcr-abl Oncogene Protein p190/bcr-abl Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤0.1ng/mL
检测范围:0.3ng/mL–20ng/mL
反应时间:一抗孵育 100min,酶标抗体 55min,避光显色 22min
显色系统:双组分 TMB 显色液
检测波长:450nm,参比 630nm
特异性:精准识别 bcr-abl 融合蛋白,不识别单独 BCR 或 ABL 蛋白
重复性:板内 CV<5%,板间 CV<7%
注意事项:样本避免凝血不完全,纤维蛋白会干扰孔底吸附
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 27min,拆开酶标板包装,截取对应数量板条,设置标准、样本、空白三类反应孔。
标准孔加入系列浓度 p190/bcr-abl 标准品 50μL;样本孔加入细胞上清稀释样本 50μL;空白孔不加液。
非空白孔加入一步法抗原抗体酶结合工作液 50μL,轻晃混匀,覆膜密封微孔板。
37℃恒温孵育 60min,全程避光操作。
倒掉孔内液体,洗板液浸泡每孔 30s 后拍干,重复洗板 4 次。
每孔添加显色液 A、B 各 50μL,遮光摇匀,37℃避光显色 15min。
加入终止液 50μL 终止显色,混匀后立即上机检测 450nm 吸光度,绘制标准曲线计算蛋白含量。
关键字: 人癌基因蛋白质;p190/bcr-abl ;ELISA试剂盒;
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