本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板微孔包被纯化的人主要穹窿蛋白特异性抗体，待测样本与标准品中的MVP抗原可与固相抗体特异性免疫结合，洗板去除游离杂质后，加入HRP标记的MVP检测抗体形成免疫夹心复合物，底物显色后终止反应，吸光度数值与MVP含量正相关，通过标准曲线可精准定量样本中目标蛋白浓度。
基本参数：
产品名称：人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒
英文名称：MVP ELISA Kit
货号：Y-E2950
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.25ng/mL
检测范围：0.5ng/mL - 32ng/mL
反应时间：孵育 58min、48min，避光显色 16min
保存条件：试剂盒 2-8℃，浓缩稀释液室温存放无变质可正常使用
显色系统：TMB A/B 等量混合显色
检测波长：450nm
标准曲线绘制：双复孔检测标准品梯度，取平均 OD 值构建标准曲线
注意事项：耐药细胞样本充分裂解，穹窿蛋白多位于胞质，裂解不完全会结果偏低
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 31min，倍比稀释 MVP 标准品，细胞质裂解上清稀释制备待测液，划分酶标板孔位组别。
向空白、标准、样本孔精准添加对应稀释液、梯度标准品、待测裂解样本，杜绝交叉污染。
一步法直接加入酶结合抗体工作液至所有微孔，低速震荡混匀 15s。
封板密封后 37℃避光孵育 66min，不可中途开启封板膜。
撕去封板倾倒液体，洗板液浸泡每孔 33s，连续洗板 5 次并拍干微孔残留洗液。
避光滴加显色 AB 底物液，室温避光显色 17min，依据颜色深浅终止显色。
终止液终止反应，450nm 检测吸光度，计算样本 MVP 穹窿蛋白浓度。
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