本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板内固定有小鼠α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)特异性捕获抗体。检测过程中,样本、标准品中的αHBDH抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离杂质成分后,加入HRP标记的配对检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物。经充分洗涤后加入TMB底物显色,酶促反应产生的显色产物浓度与样本中αHBDH含量成正比,终止反应后检测吸光度,对照标准曲线即可定量检测样本中小鼠α羟基丁酸脱氢酶的含量。
基本参数:

产品名称:小鼠α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒
英文名称:αHBDH ELISA Kit
货号:Y-E2259
规格:48T/96T
灵敏度:最小检出 0.18U/L
检测范围:0.4U/L~60U/L
反应时间:37℃孵育样本 110min,酶标二抗 62min,显色 26min,终止读数,总时长 198min
保存条件:试剂盒 2~8℃冷藏;稀释后的工作液当天配制当天使用,不可留存次日
显色系统:A+B 双组份 TMB 临用混合显色
检测波长:450nm 参考 650nm
标准曲线绘制:八点梯度标准品,非线性拟合标准曲线
注意事项:溶血样本会释放胞内酶,造成检测结果假性偏高;设置空白对照孔扣除本底。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 28min 平衡组分温度,稀释洗涤液,梯度稀释 αHBDH 标准品。
酶标板布设标准孔、待测小鼠体液样本孔、空白孔,依次加样。
直接添加酶标记结合液,封板密封,37℃孵育 68min。
弃净孔内液体,洗板 5 次,浸泡 30s / 次,彻底拍干。
避光加入显色液,显色 15min。
加入终止液终止催化反应,摇晃混匀。
测定吸光度值,标准曲线定量 αHBDH 含量。
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