本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,将小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)特异性抗体包被于酶标板微孔表面。检测体系中,样本、标准品中的β Manase抗原与固相捕获抗体特异性结合,洗涤去除非特异性结合杂质后,加入HRP标记的检测抗体,形成完整的免疫复合物。经洗涤纯化后加入TMB底物发生酶促显色反应,显色强度与样本中β Manase含量正相关,终止反应后检测吸光度值,对照标准曲线即可完成定量检测。
基本参数:

产品名称:小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒
英文名称:β Manase ELISA Kit
货号:Y-E2269
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.13U/L
检测范围:0.3U/L~50U/L
反应时间:37℃温育样本 92min,二抗 52min,避光显色 21min,终止读板,总时长 165min
保存条件:试剂盒全程 2~8℃避光;洗涤浓缩液可常温长期存放
显色系统:预制单组分 TMB 显色液
检测波长:450nm+620nm 双波长
标准曲线绘制:半对数坐标绘制标准曲线,根据 OD 值反向换算样本酶活力
注意事项:组织匀浆需充分离心去除沉淀;底物添加顺序不可颠倒。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 24min,稀释洗涤工作液,梯度制备 β 甘露糖苷酶标准品。
酶标板分孔加样标准品、待测样本与空白对照,做好位置记录。
直接加入酶标记检测液,覆膜封板,37℃孵育 55min。
洗板 4 次,每次浸泡 33s,拍干孔内废液。
避光显色底物反应 14min。
加入终止液终止显色,轻振酶标板。
读取 OD 值,依据标准曲线计算目标蛋白含量。
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关键字: 小鼠β甘露糖苷酶;β Manase;ELISA试剂盒;
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