本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔固相包被有小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)特异性抗体。检测过程中,样本及标准品中的CCL15抗原与固相抗体特异性结合,洗去未结合组分后,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,形成特异性免疫复合物。经洗涤纯化反应体系后,加入TMB底物进行酶促显色,显色深浅与样本中CCL15含量呈正相关,终止反应后测定吸光度,结合标准曲线即可精准定量样本中炎性蛋白的含量。
基本参数:

产品名称:小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA试剂盒
英文名称:MIP-1δ ELISA Kit
货号:Y-E2073
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.04pg/mL
检测范围:0.08pg/mL~1000pg/mL
反应时间:37℃样本孵育 105min,酶结合物 68min,显色 28min,终止 5min 内检测,总时长 201min
保存条件:试剂盒 2~8℃;标准品 - 20℃分装冻存,工作稀释液现配现用
显色系统:改良高灵敏度 TMB 显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:七点梯度标准品,非线性回归拟合标准曲线
注意事项:细胞上清样本避免细菌污染;设置阳性对照监控试剂盒有效性。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 29min,稀释洗涤液,配制 CCL15 系列标准品。
酶标板依次加入标准品、小鼠细胞培养上清样本、阴阳对照。
一步添加酶标记抗体,封板 37℃孵育 64min。
洗板 6 次,每次浸泡 31s,拍干微孔残留液体。
TMB 底物避光显色 16min。
终止液终止显色,混匀反应体系。
检测吸光度,绘制曲线计算 MIP-1δ 含量。
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关键字: 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ;MIP-1δ/CCL15;ELISA试剂盒;
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