柠檬酸合酶(CS)测试盒
产品介绍：
CS（EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环第一个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理：
CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB，在 412nm处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
产品名称 | 柠檬酸合酶(CS)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样、25管/12样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法、可见分光光度法 |
分类 | 乙醛酸循环系列 |
货号 | YSH3373 |
检测原理：
缩合反应：CS催化乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合生成柠檬酸
偶联酶法：反应生成的辅酶A与5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)（DTNB）反应生成黄色产物
检测波长：在412nm波长下测定黄色产物的吸光度，吸光度与CS活性正相关
能量代谢指标：CS是三羧酸循环的关键酶，其活性可反映线粒体的能量代谢水平
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操作步骤：
操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：
取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）
用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
关键字： 柠檬酸合酶;CS;测试盒;
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