脂蛋白酯酶(LPL)测试盒
产品介绍：
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
产品名称 | 脂蛋白酯酶(LPL)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 脂肪酸代谢系列 |
货号 | YSH3526 |
检测原理：
酶促水解反应：LPL催化甘油三酯水解为甘油和脂肪酸
甘油检测：甘油在甘油激酶和甘油磷酸氧化酶作用下氧化生成过氧化氢，过氧化氢与显色剂反应生成有色产物
检测波长：在500-550nm波长下测定吸光度，吸光度与LPL活性正相关
反应条件：最适pH为7.0-7.5，最适温度为37℃
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操作步骤：
标准曲线绘制：
取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。
每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
样本检测：
取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。
微量酶标仪法操作步骤
加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。
反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。
终止：每孔加入50μL终止液。
读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。
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