商品属性：
产品名称 | 碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒 | 货号 | YSH3338 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 | 检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
商品介绍：
AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
测定原理：
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
检测原理：
磷酸水解反应：ALP催化磷酸酯水解生成磷酸和醇或酚
比色法检测：常用对硝基苯磷酸酯（p-NPP）作为底物，水解生成的对硝基苯酚在碱性条件下呈黄色
检测波长：在405nm波长下测定黄色产物的吸光度，吸光度与ALP活性正相关
反应条件：最适pH为9.0-10.0，最适温度为37℃
样本前处理方法：
细菌或培养细胞样本收集：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清破碎：按照细菌或细胞数量（10⁴个）:提取液体积(mL)为500~1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）离心：8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测
组织样本取样：按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取约0.05g组织，加入0.5mL提取液），进行冰浴匀浆离心：8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测
血清/血浆样本
血清(浆)样品：直接检测
土壤样本取样：将样本风干、粉碎、过40目筛，然后称取约0.5g、加入2mL提取液（甲苯）提取：震荡提取20min，12000rpm，4℃，离心20min，取上清待测
公司正在出售的产品：
葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒微量法 | 胃抑素检测试剂盒 GIP ELISA Kit | 活动锥虫PCR检测试剂盒 |
葡萄糖含量测试盒微量法 | 尾肢同源蛋白2检测试剂盒 PYGO2/PP7910 ELISA Kit | 曼那角病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
葡萄糖脱氢酶(GCDH)测试盒微量法 | 胃粘液素检测试剂盒 GM ELISA Kit | 通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒微量法 | 细胞色素P450c21B/21-羟化酶检测试剂盒 CYP21B ELISA Kit | 马生殖泰勒氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒微量法 | 髓样分化因子初次应答基因88检测试剂盒 MYD88 ELISA Kit | 泰勒氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 |
羟甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGCS)测试盒可见分光光度法 | 硒结合蛋白1检测试剂盒 SELENBP1 ELISA Kit | 马秋博病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
羟脯氨酸(HYP)测试盒可见分光光度法 | 碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒相扑结合酶UBC9检测试剂盒 UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA Kit | 马苏大麻哈鱼病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 |
羟自由基清除能力测试盒可见分光光度法 | 蛙皮素检测试剂盒 BBS ELISA Kit | 马隐秘杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
漆酶测试盒微量法 | 外显肽检测试剂盒 extein ELISA Kit | 鸽副粘病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
测定操作步骤：
比色法/分光光度法/微量法操作仪器预热：可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到500nm/550nm，蒸馏水调零试剂配制：
试剂二：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用
试剂三：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
蒸馏水/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
试剂三 100 100
混匀后37℃水浴10min，记录500nm/550nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制：将PLD标准品稀释成0、1、2、3、4、5U/L系列浓度，同样处理，测定500nm/550nm处的吸光值，绘制标准曲线
ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度
关键字： 碱性磷酸酶;AKP/ALP;测试盒;
上海研生实业有限公司成立于2011年专业销售各种科学实验产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、等多个研究及应用领域。旗下有“上研生"品牌。
我们努力将欧美进口品牌的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视国内科研市场的产品开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。
同时国家对于生物行业的发展给予极大的重视，更多地侧重于科研的投入。公司的服务和业务在同行获得认可。也具备丰富的管理经验，同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想，更有责任感，是您科研道路上值得信赖的伙伴。
公司的理念是：以诚信为本，努力打造优质品牌，为您提供产品的售中、售后服务。