本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理,将高亲和力的抗大鼠IL-3抗体包被于96孔酶标板微孔中,作为固相捕获载体,加入待测样本和梯度标准品后,其中的IL-3抗原被特异性捕获,洗板去除非特异性结合成分,再加入HRP酶标检测抗体形成夹心复合物,经TMB底物显色、终止液终止反应后,检测各孔吸光度,吸光度数值与IL-3抗原浓度呈线性正相关,通过标准曲线即可计算出大鼠样本中IL-3的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒
英文名称:IL-3 ELISA Kit
货号:Y-E1493
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤1.0pg/mL
检测范围:2.5pg/mL - 850pg/mL
反应时间:整体实验时长3.7小时
保存条件:2-8℃避光保存,标准品单独密封存放
有效期:原装试剂盒6个月,分装标准品1个月有效
显色系统:高灵敏TMB显色体系,低背景、高辨识度
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:浓度梯度对应OD值拟合曲线,R²>0.995
特异性:特异性识别大鼠IL-3,与其他造血相关细胞因子无明显交叉反应
重复性:板内CV≤7.2%,板间CV≤9.2%
注意事项:避免样本反复冻融,会导致蛋白降解;孵育温度偏差不超过±1℃;终止后尽快上机读数
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

IL-3 标准品复溶梯度稀释,试剂盒室温平衡 26min,排布酶标板孔位;
标准孔、待测孔分别加入 50μL 标准品、大鼠体液样本,空白孔填充稀释液;
所有微孔加入 100μL 酶标抗 IL-3 抗体,覆膜密封板面;
37℃恒温孵育 58min,一步完成抗原抗体结合;
洗板液浸泡微孔 40s,吸干,循环洗涤 5 次;
避光加入显色底物混合液 100μL,37℃避光显色 15min;
终止液混匀微孔,450nm 测吸光度,根据标准曲线计算 IL-3 含量。
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关键字: 大鼠白介素3;IL-3;ELISA试剂盒;
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