本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板预先包被特异性抗大鼠IL-8(CXCL8)捕获抗体,加入梯度标准品与大鼠待测样本后,样本中的IL-8抗原与固相抗体特异性结合,洗板清除游离杂质,再加入辣根过氧化物酶标记的IL-8检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物,底物显色后根据吸光度变化,结合标准曲线定量测定大鼠样本中IL-8的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒
英文名称:IL-8 ELISA Kit
货号:Y-E1586
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.4pg/mL
检测范围:0.8pg/mL - 900pg/mL
反应时间:总时长3.2小时,快速检测体系
保存条件:2-8℃避光保存,严禁冷冻
有效期:原装6个月,开封后密封可存30天
显色系统:超高灵敏TMB显色体系,梯度区分度高
检测波长:450nm/630nm双波长校正
标准曲线绘制:8个浓度梯度,曲线拟合R²≥0.997
特异性:特异性识别大鼠IL-8/CXCL8,与其他趋化因子无交叉反应
重复性:板内CV≤6.2%,板间CV≤8.2%
注意事项:IL-8易降解,样本需低温保存、快速检测;显色终止后10分钟内完成读数
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

IL-8 标准品梯度稀释,试剂盒室温平衡 32min,划分酶标板孔位;
每微孔添加 50μL 梯度标准品或大鼠体液样本,空白孔补稀释缓冲液;
快速加入 100μL HRP 标记 IL-8 特异性抗体,覆膜封闭;
37℃恒温孵育 70min,一步同步结合样本抗原与标记抗体;
洗板液浸泡微孔 40s,拍干,重复洗涤 6 次;
避光添加显色底物混合液 100μL,37℃避光反应 14min;
终止液混匀,450nm 检测吸光度,换算 IL-8/CXCL8 含量。
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