大鼠白介素32(IL-32)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心酶联免疫吸附原理，酶标板预先包被抗大鼠IL-32特异性单克隆捕获抗体，加入标准品与大鼠待测样本后，样本中的IL-32抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合物质后，加入酶标记的IL-32检测抗体，形成稳定的三元免疫复合物，底物在酶的作用下发生显色反应，显色强度与样本中IL-32浓度正相关，终止反应后上机检测吸光度，结合标准曲线实现IL-32含量的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠白介素32(IL-32)ELISA试剂盒

英文名称：IL-32 ELISA Kit
货号：Y-E1044

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.7pg/mL

检测范围：1pg/mL - 500pg/mL

反应时间：全程3.2小时，快速检测体系

保存条件：2-8℃密封避光保存，禁止冷冻所有试剂

有效期：未开封6个月，开封后1个月内用完

显色系统：单组分TMB显色液，操作简便、稳定性强

检测波长：450nm精准检测

标准曲线绘制：6个梯度浓度，四参数拟合标准曲线

特异性：特异性靶向大鼠IL-32炎症因子，交叉反应率＜4%

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：浑浊样本需高速离心澄清；试剂配比严格按照说明书；避免强光照射显色液
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 30min，溶解 IL-32 标准品做倍比稀释，标记酶标板各类微孔；

各微孔添加 50μL 梯度标准品或大鼠组织上清，空白孔补样本稀释液；

快速加入 100μL HRP 标记抗 IL-32 检测抗体，密封酶标板；

37℃避光孵育 68min，一步共孵育结合抗原与标记抗体；

洗涤液浸泡微孔 35s，彻底拍干，重复洗板 6 次；

避光加显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反应 16min；

终止液终止显色，混匀后 450nm 读数，拟合曲线计算 IL-32 浓度。
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