大鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将纯化的抗大鼠IL-9抗体包被于酶标板微孔中，构建固相免疫反应体系，样本与标准品中的IL-9抗原特异性结合于固相抗体，洗涤后加入酶标记检测抗体形成夹心复合物，经底物显色反应产生特异性颜色信号，显色强度与IL-9抗原浓度呈正相关，终止反应后上机检测，通过标准曲线计算样本中IL-9的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

英文名称：IL-9 ELISA Kit
货号：Y-E1580

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤1.0pg/mL

检测范围：2.5pg/mL - 700pg/mL

反应时间：完整实验流程3.5小时

保存条件：2-8℃低温密封避光保存

有效期：未开封原装6个月

显色系统：经典TMB-HRP显色系统，底色干净

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：7梯度标准品，四参数拟合标准曲线

特异性：特异性结合大鼠IL-9，无同源细胞因子交叉反应

重复性：板内CV≤7.8%，板间CV≤9.8%

注意事项：孵育温箱湿度保持饱和，防止孔内液体蒸发；所有耗材干净无杂质
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

室温平衡试剂盒组分 29min，稀释 IL-9 标准品，标记酶标板各类微孔；

标准孔加 50μL 梯度标准品，样本孔加入大鼠血清 50μL，空白孔加稀释液；

全部微孔加入 100μL 酶标记抗 IL-9 抗体，密封酶标板；

37℃避光孵育 63min，一步孵育完成免疫结合；

洗涤缓冲液浸泡 35s，吸干，洗板 5 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 16min；

终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，计算 IL-9 浓度。
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