本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验原理,微孔板预先包被大鼠LTE4固相抗原,反应体系中待测样本中的游离LTE4抗原与固相抗原竞争性结合酶标记特异性抗体,二者形成竞争抑制关系,样本中LTE4含量越高,固相免疫复合物的酶活性越低,底物显色越浅,终止反应后检测各孔吸光度,依据标准曲线的负相关对应关系,精准定量大鼠样本中LTE4的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒
英文名称:LT-E4 ELISA Kit
货号:Y-E1102
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤2.0pg/mL
检测范围:7pg/mL - 2000pg/mL
反应时间:总时长4.5小时,充分结合反应
保存条件:2-8℃避光低温保存,禁止冷冻
有效期:原装试剂盒6个月
显色系统:适配LTE4检测的专用显色体系,背景低、灵敏度高
检测波长:450nm/630nm双波长校正
标准曲线绘制:8梯度浓度,四参数拟合,R²≥0.992
特异性:特异性识别大鼠LTE4,不与LTB4、LTC4及炎症脂质因子交叉反应
重复性:板内CV≤8.5%,板间CV≤10.5%
注意事项:全程避光、低温操作;浑浊样本必须离心澄清;严格控制孵育温度和时长
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

LTE4 冻干标准品复溶稀释,试剂盒室温平衡 30min,划分酶标板孔类型;
各微孔加入 50μL 标准品或大鼠体液样本,空白孔添加等量稀释缓冲液;
加入 100μL 辣根酶标记抗 LTE4 抗体,密封酶标板防止蒸发;
37℃避光孵育 61min,一步完成抗原标记抗体结合;
洗板液浸泡微孔 35s,拍干,连续洗板 5 次;
避光添加显色底物混合液 100μL,37℃避光显色 16min;
终止液混匀,450nm 检测 OD 值,计算 LTE4 表达量。
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