本试剂盒采用间接ELISA检测原理,预先将纯化的大鼠磷脂酰肌醇抗原包被于酶标板,加入待测大鼠样本,样本中的PI特异性IgG、IgM抗体可与固相抗原结合,洗涤后加入对应的酶标记抗大鼠IgG/IgM二抗,结合后催化底物显色,终止反应后检测吸光度,根据标准曲线定量分析样本中PI Ab-IgG/IgM的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒
英文名称:PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
货号:Y-E1629
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测滴度≤1:100
检测范围:1:100 - 1:3200样本稀释梯度
反应时间:总反应时长160min
保存条件:2-8℃避光密封保存,抗体试剂严禁冷冻,开封后密封防潮
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:TMB特异性显色体系,适配抗体免疫结合反应
检测波长:450nm波长检测
标准曲线绘制:采用阳性对照梯度稀释,拟合标准曲线,判定抗体滴度及含量
特异性:特异性识别大鼠PI特异性IgG、IgM抗体,与其他脂类抗体无交叉反应
重复性:板内CV<9%,板间CV<11%
注意事项:血清样本需充分离心分离,无溶血、浑浊;样本稀释比例精准,避免滴度检测误差;温育全程避光,保证免疫结合充分
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

预包被板各孔加入标准品梯度液 55μL,待测大鼠血清样本 55μL,设置阴性空白孔。
全孔加入双标抗体酶工作液 95μL,封板避光,37℃恒温孵育 68min。
弃去孔内液体,洗涤液浸泡每孔 32s,倒扣拍干,洗板 4 次。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,混匀后室温显色 19min。
加入终止液 50μL 终止反应,横向摇晃微孔板混匀。
酶标仪 450nm 读取吸光度,记录每孔原始 OD 数值。
分别计算 IgG、IgM 两项指标浓度,根据曲线结果判读抗体表达水平。
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关键字: 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM;PI Ab-IgG/IgM;ELISA试剂盒;
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