大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板包被大鼠OT/BGP特异性抗体，样本中的骨钙素抗原与包被抗体特异性结合，结合酶标记二抗后发生显色反应，终止后检测吸光度，吸光度值与样本中OT/BGP浓度呈正相关，可精准定量大鼠骨钙素含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.2ng/mL

检测范围：0.5ng/mL - 50ng/mL

反应时间：总反应时长110分钟（样本温育50分钟、酶温育30分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光保存，洗涤液室温存放，试剂开封后及时密封

有效期：未开封有效期12个月，开封后2个月内使用

显色系统：TMB底物显色体系，显色稳定

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数拟合，R²≥0.995

特异性：特异性结合大鼠骨钙素，与骨桥素、骨粘连蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%

注意事项：血清样本新鲜采集，避免长期放置；严格把控洗涤次数，减少非特异性吸附
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温放置 27min，稀释 OT/BGP 冻干标准品设置浓度梯度，排布酶标板孔位组别。

直接向对应孔加入标准品、大鼠血清待测样本各 100μL，空白孔加入等量稀释液。

覆膜密封酶标板，37℃孵育 62min，让骨钙素与固相抗体结合。

弃净液体，洗涤液加满每孔静置 25s，洗板 4 次，吸水纸拍干余液。

非空白孔加入酶标二抗工作液 100μL，避光 37℃孵育 25min。

加入显色底物液 100μL，避光轻震，显色 11min。

终止液终止显色，450nm 测吸光度，对照标准曲线计算 OT/BGP 数值。