大鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒

本试剂盒采用高灵敏双抗体夹心ELISA法，酶标板微孔固定大鼠OPN特异性抗体，样本中的骨桥素抗原与包被抗体特异性结合，形成的免疫复合物结合酶标抗体后催化底物显色，吸光度与样本OPN浓度正相关，可精准测定大鼠样本中骨桥素的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤12pg/mL

检测范围：25pg/mL - 900pg/mL

反应时间：总反应时长130分钟（样本温育70分钟、酶二抗温育30分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光保存，标准品-20℃分装冻存

有效期：未开封有效期6个月，开封后1个月内使用

显色系统：TMB高灵敏度显色体系

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：四参数逻辑拟合，R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠OPN蛋白，与骨钙素、骨粘连蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：组织样本充分匀浆离心，去除杂质；样本无反复冻融，保证蛋白完整性
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，复溶 OPN 标准品配制 6 个梯度浓度，标记酶标板各孔用途。

直接加样：标准孔加梯度标准品 100μL，待测孔加大鼠肾脏组织上清 100μL，空白孔加稀释液。

密封酶标板，37℃孵育 80min，完成 OPN 抗原与包被抗体结合。

弃液后洗涤液注满每孔静置 33s，洗板 5 次，倒扣拍干孔底残留洗液。

除去空白孔，加入 HRP 标记检测抗体 100μL，避光 37℃孵育 32min。

加入显色 AB 混合液 100μL，轻柔震荡，避光显色 17min。

终止液终止酶促反应，450nm 测定吸光值，拟合标准曲线得到 OPN 含量。