大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，预先将大鼠中性粒/中心体特异性抗原包被于酶标板，封闭非特异性位点后加入待测样本，样本中的ACA抗体可与固相抗原特异性免疫结合，洗涤后加入HRP标记二抗孵育结合，底物显色终止后测定吸光度，吸光度值与样本ACA抗体含量正相关，通过标准曲线可定量检测目标抗体浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒

英文名称：ACA ELISA Kit
货号：Y-E1628

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.12ng/mL

检测范围：0.24ng/mL - 15ng/mL

反应时间：总反应时长135分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏，防潮密封保存

有效期：未开封有效期8个月

显色系统：单组分TMB显色液，操作便捷

检测波长：450nm检测波长

标准曲线绘制：四参数Logistic拟合标准曲线

特异性：特异性识别大鼠抗中性粒、中心体抗体，与其他细胞抗体无交叉反应

重复性：板内CV≤8.3%，板间CV≤9.7%

注意事项：样本离心彻底，无细胞沉淀；洗涤步骤充分，降低本底值
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 27min，稀释洗涤缓冲液，调配酶应用液。

分组标记酶标板微孔，空白孔只加稀释液，标准品、对照、待测稀释样本与酶试剂同步加孔。

封板 37℃孵育 64min。

洗板 6 次，浸泡 31s / 次，彻底吸干板内残留洗液。

显色底物避光反应 13min。

终止液混匀终止体系反应。

450nm 酶标仪测值，计算 ACA 抗体含量。
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