本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板包被大鼠sCD14特异性捕获抗体,待测样本中的可溶性CD14抗原可与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离杂质后,加入HRP标记的sCD14检测抗体,构建夹心免疫复合物,经显色、终止反应后测定吸光度,吸光度值与样本sCD14含量正相关,通过标准曲线定量检测样本抗原水平。
基本参数:

产品名称:大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒
英文名称:sCD14 ELISA Kit
货号:Y-E1086
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.04ng/mL
检测范围:0.08ng/mL - 19ng/mL
反应时间:总反应时长130分钟
保存条件:2-8℃避光保存,可溶性细胞因子试剂防潮密封
有效期:原装有效期12个月
显色系统:稳定型双组分TMB显色体系
检测波长:450nm检测波长
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,适配可溶性受体检测
特异性:特异性识别大鼠sCD14,无其他CD分子交叉反应
重复性:板内CV≤6.3%,板间CV≤7.6%
注意事项:可溶性蛋白样本避免反复冻融;洗涤充分去除游离杂质
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 31min,稀释浓缩洗涤缓冲液待用。
分孔加样,空白孔仅加稀释缓冲液,梯度标准品、质控、待测样本稀释后上样并加入酶结合液。
封板后 37℃孵育 66min。
洗板 6 次,浸泡 30s 每次,吸干板孔残留液体。
底物避光 37℃显色 17min。
终止液滴入混匀终止反应。
酶标仪 450nm 测吸光度,标准曲线定量 sCD14。
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