本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法原理，酶标板包被大鼠sIL-6R特异性捕获抗体，待测样本中的可溶性白介素6受体抗原可与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离物质后，加入HRP标记检测抗体构建免疫夹心复合物，显色终止后测定吸光度，吸光度值与样本sIL-6R含量正相关，依托标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)ELISA试剂盒
英文名称：sIL-6R ELISA Kit
货号：Y-E1038
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度小于2.0 pg/mL
检测范围：10 pg/mL - 300 pg/mL
反应时间：全程120分钟（样本孵育60min、酶标孵育30min、显色30min）
保存条件：2-8℃整体保存，浓缩试剂密封存放，防止挥发浓缩
有效期：12个月
显色系统：过氧化物酶催化TMB底物显色，酸性终止稳定读数
检测波长：450nm
标准曲线绘制：六梯度标准浓度拟合，R²≥0.992
特异性：特异性结合大鼠sIL-6R，与IL-6、其他白介素受体无交叉反应
重复性：板内CV＜7%，板间CV＜9%
注意事项：样本避免反复冻融，会导致受体蛋白降解；孵育需37℃恒温，禁止室温孵育；不同批次试剂盒试剂不可混用。
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
试剂室温回温 27min，稀释洗涤缓冲液，调配酶应用液。
标记各孔功能，空白孔仅加稀释液，梯度标准品、对照、待测稀释样本与酶液共同加孔。
封板 37℃孵育 64min。
洗板 5 次，浸泡 30s 每次，彻底拍干残留洗液。
显色底物避光 13min 显色。
滴加终止液混匀终止酶反应。
酶标仪 450nm 读数，标准曲线定量 sIL-6R。
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