大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被大鼠LHRH特异性抗体，样本中的黄体生成素释放激素抗原与包被抗体特异性结合，结合酶标记二抗后显色，吸光度与样本LHRH浓度正相关，可精准定量检测其含量水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.05ng/mL

检测范围：0.1ng/mL～8ng/mL

反应时间：总时长110min，孵育80min，显色20min，读数5min

保存条件：2～8℃避光冷藏，激素试剂单独存放，避免交叉污染

有效期：未开封6个月，开封后1个月内用完

显色系统：激素专用高灵敏TMB显色系统

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：梯度标准品检测，四参数拟合，R²≥0.992

特异性：特异性识别大鼠LHRH，与促性腺激素、其他下丘脑激素无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：下丘脑、血清样本需低温采集保存；避免反复冻融导致激素降解；孵育湿度100%，防止干孔。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温放置 36min，倍比稀释 LHRH 多肽标准品，排布酶标板空白对照、标准、大鼠下丘脑匀浆样本孔。

直接向对应孔加入标准品、稀释下丘脑上清样本各 100μL，空白孔补样本稀释缓冲液。

封板封口，37℃孵育 85min，特异性结合释放激素 LHRH。

倒掉孔内废液，洗涤液浸泡每孔 43s，连续洗板 6 次，洗脱杂蛋白干扰。

非空白孔加入酶标记二抗工作液 100μL，避光 37℃孵育 38min。

依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀避光显色 20min。

加入终止液终止显色，酶标仪 450nm 读数，依据标准曲线得出 LHRH 含量。