本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理,酶标板微孔包被大鼠GRH固相抗原,加入待测样本和酶标GRH抗体后,样本中的游离GRH抗原与固相抗原竞争结合有限的酶标抗体,GRH浓度越高,固相结合的酶活性越低,底物显色越浅,终止反应后检测吸光度,结合标准曲线精准定量大鼠样本中GRH的含量水平。
基本参数:

产品名称:大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒
英文名称:GHRH ELISA Kit
货号:Y-E1598
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测值0.06ng/mL,精准检测大鼠下丘脑微量GRH分泌量。
检测范围:0.2ng/mL - 9ng/mL,适配大鼠生长发育、代谢模型GRH检测。
反应时间:总时长100分钟,样本孵育35min、酶抗体孵育30min、显色30min、终止读数5min。
保存条件:2 - 8℃密封避光保存,所有试剂避免室温长时间放置。
有效期:未开封有效期6个月,开封后2周内使用最佳。
显色系统:生长激素专用TMB显色体系,显色梯度均匀稳定。
检测波长:450nm主波长,620nm参比波长。
标准曲线绘制:五梯度标准品拟合,四参数方程,R²≥0.994。
特异性:特异性结合大鼠GRH,与其他下丘脑释放激素无交叉反应。
重复性:板内CV≤3.5%,板间CV≤5.5%,重复性优异。
注意事项:生长激素样本需低温分装保存,杜绝反复冻融;孵育温度、时间严格标准化;洗板彻底,保证检测精准度。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

GRH 标准品梯度稀释,试剂盒室温平衡 30min,排布酶标板孔位;
各微孔添加 50μL 梯度标准品或大鼠垂体组织上清,空白孔填充稀释缓冲液;
加入 100μL 辣根酶标记抗 GRH 检测抗体,覆膜封闭板面;
37℃避光孵育 64min,一步同步形成免疫复合物;
洗涤缓冲液浸泡 30s,吸干残留液体,重复洗涤 6 次;
避光添加显色底物混合液 100μL,37℃避光反应 13min;
终止液混匀,450nm 读取 OD 值,对照曲线换算 GRH 浓度。
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