大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒

本试剂盒采用通用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板预先包被大鼠淋巴细胞因子特异性捕获抗体，待测样本中的各类淋巴细胞因子可与固相抗体发生特异性免疫结合，洗去游离杂质后，加入对应的酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，经底物催化显色、终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中淋巴细胞因子含量呈正相关，通过标准曲线可精准定量样本中目标淋巴细胞因子的浓度水平。
基本参数‌：

产品名称：大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒

英文名称：Rat lymphocyte factor ELISA Kit
货号：Y-E1160

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于2.0 pg/mL

检测范围：10 pg/mL - 350 pg/mL

反应时间：全程120分钟（样本孵育60min、酶标孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光密封保存，所有组分禁止冷冻

有效期：12个月

显色系统：通用型HRP-TMB显色系统，适配广谱淋巴细胞因子检测

检测波长：450nm，600nm校准背景值

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠各类淋巴细胞活性因子，与非淋巴细胞因子交叉反应率＜5%

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：样本无溶血、无污染，保证因子活性；实验环境洁净恒温；试剂按需取用，避免反复开封氧化失效。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 33min，稀释浓缩洗涤缓冲液待用。

划分酶标板孔位，空白孔添加稀释缓冲液，标准品、阴阳性对照、待测稀释淋巴细胞样本搭配酶结合试剂加样。

密封酶标板，37℃孵育 67min。

洗板 5 次，浸泡 33s / 次，清除微孔内全部废液。

显色液避光 37℃显色 17min。

加入终止液终止反应并水平摇匀酶标板。

450nm 波长检测 OD 值，依据标准曲线计算样本淋巴细胞因子总含量。
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