本试剂盒采用特异性间接ELISA检测原理,酶标板固相包被弓形体特异性抗原,待测样本中的人抗弓形体IgM抗体可与固相抗原特异性结合;经洗涤去除未结合成分后,加入针对人IgM的酶标记特异性二抗进行孵育结合,彻底洗涤后加入底物发生酶促显色反应,终止反应后检测吸光度,显色深浅对应样本中anti-tox IgM抗体的含量,可精准定量检测目标抗体浓度。
基本参数:

产品名称:人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)ELISA试剂盒
英文名称:anti-tox IgG ELISA Kit
货号:Y-E2721
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.08IU/mL
检测范围:0.1IU/mL~6.4IU/mL
反应时间:样本孵育 60min;酶标抗体 35min;显色 12min
保存条件:2~8℃冷藏,底物液避光单独存放
显色系统:TMB 酶促显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:倍比稀释标准品,线性回归绘制曲线,计算 IgM 抗体含量
注意事项:类风湿因子干扰样本需预处理;终止后 15min 内完成酶标仪读数
通用注意事项:

样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下:

样本稀释:血清样本 1:105 稀释,充分混匀,室温静置 8min,避免样本反复冻融。
加样铺板:酶标板各孔依次加入空白液、质控对照液、稀释待测样本 100μL。
一步加入酶标记抗人 IgM 抗体:每孔直接加入酶结合物 100μL,封板震荡混匀。
孵育结合:37℃避光孵育 58min。
洗板:洗涤液浸泡 30s / 次,拍干,洗板 5 次。
显色:AB 显色液各 50μL,37℃避光显色 14min。
终止测定:终止液终止,450nm 测 OD 值,计算样本抗体滴度。
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