大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒

本试剂盒基于酶联免疫吸附双夹心检测原理，固相载体包被大鼠MMP-5特异性抗体，可特异性识别并结合样本中的MMP-5抗原。通过样本孵育、洗涤、酶标抗体结合等步骤，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，去除未结合多余组分后进行底物显色反应。显色强度与样本中MMP-5的含量成正比，通过酶标仪检测吸光度并对照标准曲线，能够定量检测大鼠各类生物样本中MMP-5的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.12ng/mL

检测范围：0.25ng/mL - 8.5ng/mL

反应时间：总反应时长120min（样本孵育60min、酶结合30min、显色30min）

保存条件：2-8℃干燥避光保存，严禁低温冷冻导致试剂失效

有效期：12个月（未开封）

显色系统：TMB底物显色，硫酸终止液终止显色反应

检测波长：450nm

标准曲线绘制：6点梯度标准品检测，四参数拟合曲线，精准换算样本浓度

特异性：高特异性识别大鼠MMP-5，无同源蛋白交叉反应

重复性：板内CV≤9%，板间CV≤10%

注意事项：样本采集后及时检测，短期保存需-20℃分装冻存，避免反复冻融
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂室温回温 30min，稀释浓缩洗液，溶解并梯度稀释 MMP-5 标准品，选取酶标板条。

标准孔添加梯度标准品 50μL，样本孔加入稀释后大鼠样本 50μL，空白孔补加样本稀释液。

全孔添加酶标记工作液 100μL，封板膜封闭，37℃孵育 60min。

洗板 5 次，每次洗液浸泡 30s，弃液后充分拍干微孔内液体。

避光加入显色液 A、B 各 50μL，37℃避光显色 14min。

加入终止液 50μL 终止反应，震荡混匀。

450nm 检测 OD 值，用标准曲线计算 MMP-5 样本浓度。