本试剂盒基于双抗体夹心酶免疫检测原理,酶标板预先包被大鼠CNTF特异性抗体,用于特异性捕获待测样本中的睫状神经营养因子抗原。经过孵育结合、洗板净化、酶标抗体结合、底物显色等步骤后,检测各孔吸光度数值。吸光度与样本中CNTF含量呈正相关,通过标准曲线拟合计算,可精准定量大鼠样本中CNTF的表达水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1663 |
英文名称 | CNTF ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度0.05pg/mL,超高灵敏度,可检测神经组织微量CNTF表达。
检测范围:0.1pg/mL - 18pg/mL,适配大鼠视神经、视网膜、脑组织及细胞上清样本。
反应时间:全流程100分钟,抗体孵育70分钟,显色反应20分钟,反应充分彻底。
保存条件:所有核心试剂2-8℃避光保存,严禁冷冻,洗涤液室温密封存放。
有效期:原装未拆封有效期6个月,开封后试剂4周内用完。
显色系统:HRP标记抗体搭配TMB底物显色,显色稳定,特异性强,无杂色干扰。
检测波长:450nm主波长,630nm校正波长,消除背景误差。
标准曲线绘制:梯度标准品检测取值,四参数拟合标准曲线,R²≥0.992。
特异性:仅识别大鼠CNTF,与GDNF、BDNF、NT-3等神经营养因子无交叉反应。
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤8%,数据稳定性优异。
注意事项:神经组织样本需低温匀浆,防止因子降解;温育温度需严格控制在37℃;显色时间精准把控,保证梯度准确。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒室温静置 30min,配制洗涤液,稀释 CNTF 冻干标准品,裁剪所需酶标板条。
标准孔加梯度标准品 50μL,神经组织样本孔加入稀释待测液 50μL,空白孔添加稀释液。
全孔加入酶偶联抗体 100μL,密封酶标板,37℃孵育 60min。
洗板 5 次,浸泡 30s 每轮,甩干液体拍干板孔。
避光添加显色 A、B 底物各 50μL,37℃避光显色 15min。
终止液 50μL 加入各孔终止反应。
450nm 读值,标准曲线得到 CNTF 检测结果。
关键字: 大鼠睫状神经营养因子;CNTF;ELISA试剂盒;
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