人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争抑制型ELISA检测原理，微孔板固相载体包被5羟色胺特异性抗原，向孔内加入标准品、待测样本和定量特异性抗体，样本中的5-HT抗原与板上固定抗原竞争结合抗体，孵育完成后洗涤除去未结合成分，加入辣根过氧化物酶标记二抗孵育，洗涤后加入底物显色，酶促反应产物的吸光度值与样本中5-HT含量呈负相关，根据标准曲线对应的浓度梯度，即可计算出待测样本中5羟色胺的具体含量。
基本参数‌：

产品名称：人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒

英文名称：E685 5HT  Elisa Kit
货号：Y-E685 5HT

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.1ng/mL，可检出人体微量神经递质含量

检测范围：0.3ng/mL - 80ng/mL，适配神经、内分泌相关样本检测

反应时间：全程反应时长110分钟，分阶段温育，保证抗原充分结合

保存条件：试剂盒2-8℃冷藏避光保存，酶标板防潮密封，禁止冷冻

有效期：原装有效期12个月，拆分试剂开封后20天内使用

特异性：特异性结合人5羟色胺，与多巴胺、去甲肾上腺素等神经递质无交叉反应

重复性：板内CV≤6.5%，板间CV≤8.5%，重复性优异

注意事项：样本避免反复冻融，溶血样本不可使用；显色过程严格避光，终止后立即上机读数，确保数据精准
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

样本制备：血清样本静置分离，避免反复冻融，按 1:6 比例稀释待测样本；标准品复溶倍比稀释设置 5 组浓度。

孔位加样：空白孔加稀释缓冲液 50μL，标准孔、样本孔分别加入对应液体 50μL。

一步法加酶标记液：全部孔加入 HRP 标记二抗 100μL，封板轻摇混匀。

恒温孵育：37℃避光孵育 60min。

洗板流程：洗涤液浸泡每孔 25s，连续洗板 5 次，倒扣拍干残液。

底物显色：TMB 显色液每孔 100μL，37℃避光反应 17min。

终止定量：终止液终止反应，450nm 检测吸光值，绘制标准曲线计算 5-HT 含量。
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