本试剂盒依托竞争法酶联免疫吸附技术原理,将5羟基吲哚乙酸偶联抗原包被于微孔板,实验中加入待测样本、标准品及特异性一抗,样本中的5-HIAA与固相偶联抗原竞争结合一抗,孵育平衡后洗板去除游离物质,加入酶标记二抗孵育结合,充分洗涤后加入底物液启动显色反应,显色深浅随样本中5-HIAA浓度升高而降低,通过酶标仪测定吸光度数值,结合标准曲线回归方程,可精准定量样本中5羟基吲哚乙酸的浓度。
基本参数:

产品名称:人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒
英文名称:5-HIAA ELISA Kit
货号:Y-E2692
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测值0.2μmol/L,适配神经递质代谢产物微量检测
检测范围:0.5μmol/L - 15μmol/L,覆盖人体体液正常代谢含量区间
反应时间:标准反应时长100分钟,温育、显色步骤标准化
保存条件:2-8℃密封避光保存,显色液、终止液分开存放,避免混放反应
有效期:未开封有效期8个月,开封后试剂30天内使用完毕
特异性:特异性识别5羟基吲哚乙酸,与吲哚乙酸、5羟色胺无交叉反应
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,批量检测稳定性好
注意事项:尿液、血清样本需预处理去除杂质,避免代谢物干扰;实验温度恒定37℃,禁止超时显色,防止数值偏高
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

样本前处理:尿液样本按试剂盒说明稀释,离心去除沉淀物;标准品粉剂溶解后梯度稀释配制标准系列。
上样加液:空白孔添加样本稀释液 50μL;标准品孔加梯度标准液 50μL;待测孔加入处理后尿液样本 50μL。
一步添加酶结合物:所有孔加入酶标记抗体液 100μL,覆膜密封酶标板。
温育孵育:37℃避光孵育 50min,静置孵育不晃动。
洗板除游离物:弃液洗板,每孔浸洗 35s,重复 5 次,彻底拍干。
避光显色:每孔加显色 A、B 液各 50μL,37℃显色 13min。
终止测 OD:加入终止液,酶标仪 450nm 读数,计算样本 5-HIAA 浓度。
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