大鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔预先包被大鼠组胺特异性抗原。孵育时，待测样本中的组胺与微孔固相抗原竞争结合HRP标记的组胺特异性抗体，样本中组胺浓度越高，固相载体结合的酶标抗体含量越低。洗板去除未结合抗体后，加入TMB底物进行显色反应，显色强度与样本中组胺含量呈负相关，终止反应后检测吸光度数值，通过标准曲线回归计算，可精准测定大鼠样本中组胺的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤5.0pg/mL

检测范围：10pg/mL - 500pg/mL

反应时间：总反应120分钟（孵育60min、酶孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光冷藏，组胺试剂易降解，需密封严实

有效期：12个月

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.990

注意事项：样本采集后快速低温保存，避免组胺降解，实验全程避光
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

1. 试剂盒所有试剂室温平衡 30min，配制 1× 洗涤液，待测样本避光低温预处理后离心取上清，划分酶标板孔组。

2. 标准品孔加入系列稀释组胺标准品 50μL，样本孔加入 50μL 待测上清，空白孔添加稀释缓冲液。

3. 各孔加入酶偶联工作液 100μL，封板膜密封，混匀后 37℃孵育 68min。

4. 弃净孔内液体，洗板 4 次，单次浸泡 30s，吸水纸彻底拍干板孔。

5. 避光添加显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 12min。

6. 每孔加入终止液 50μL 终止显色，充分摇晃混匀。

7. 酶标仪 450nm 读数，拟合标准曲线测定组胺含量。