本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔内固定绵羊主要组织相容性复合体(MHC)特异性抗体,待测样本与梯度标准品中的MHC抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板后加入酶标记特异性检测抗体,构建完整的抗原抗体夹心体系,经显色、终止反应后,吸光度值与MHC抗原含量正相关,可精准定量检测绵羊MHC的含量。
产品参数:
产品名称 | 绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3345 |
英文名称 | MHC ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检出浓度0.08ng/mL,精准检测绵羊血清、免疫组织中MHC蛋白含量。
检测范围:0.16ng/mL - 90ng/mL,适配绵羊遗传免疫、疫病抗性研究检测。
反应时间:总实验时长95分钟,恒温孵育45分钟,避光显色20分钟。
保存条件:2-8℃密封避光保存,全程低温稳定存放。
有效期:未拆封有效期12个月。
特异性:特异性结合绵羊MHC复合体,与其他畜禽MHC蛋白无交叉识别反应。
重复性:板内CV≤5.5%,板间CV≤7.5%,科研实验重复性良好。
注意事项:样本避免溶血、脂血,血液杂质会严重干扰MHC蛋白检测数值。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒常温放置 38min,稀释洗涤液,拆分微孔板条,对各组微孔进行编号区分。
绵羊 MHC 标准品系列稀释,绵羊血清 / 细胞上清预处理稀释,每孔添加 50μL 待测溶液。
一步法直接滴加酶标记特异性抗体液 100μL,封板膜封紧酶标板。
37℃避光孵育 70min,完成一步夹心 ELISA 捕获结合。
洗板 6 次,每孔加满洗涤液静置 34s,彻底甩干板内残留液体。
避光依次加入显色 A 液、B 液各 50μL,摇匀后室温显色 20min。
加入终止液终止显色反应,酶标仪 450nm 测定 OD 值,定量绵羊 MHC 分子表达水平。
关键字: 绵羊主要组织相容性复合体;MHC;ELISA试剂盒;
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