本试剂盒采用竞争酶联免疫吸附试验原理,针对植物赤霉素(GA)建立特异性免疫检测体系,微孔板包被GA固相抗原,样本中的植物赤霉素与固相抗原竞争结合酶标抗体,显色强度与GA浓度呈负相关,通过标准曲线计算,可定量检测植物样本中赤霉素的含量。
产品参数:
产品名称 | 植物赤霉素(GA) ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3418 |
英文名称 | GA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.04ng/g,可精准检测植物组织中微量赤霉素含量
检测范围:0.1ng/g - 200ng/g,适配植物叶片、茎秆、根系、种子组织样本
反应时间:全流程90分钟,植物激素反应体系适配性强
保存条件:2-8℃避光冷藏,禁止冷冻,试剂开封后密封防潮
有效期:未开封有效期12个月,储存稳定
特异性:专一识别植物赤霉素GA系列,与生长素、细胞分裂素等植物激素无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,实验重复性良好
注意事项:植物样本液氮速冻研磨,避免激素降解;提取液需纯化除杂,去除植物色素干扰;全程避光操作,底物易光解。
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
试剂盒试剂室温回温 30min,稀释洗涤液,植物组织研磨提取液过滤稀释,酶标板标记空白、标准品、植物样品孔。
标准孔加入 GA 梯度标准溶液,样品孔加入植物提取待测液,空白孔加入提取稀释缓冲液。
一步法加入酶标记 GA 抗原工作液,封板膜包裹酶标板,轻微震荡混匀。
37℃避光孵育 65min,开展竞争免疫结合反应。
弃除孔内液体,洗板 6 次,每孔洗涤浸泡 32s,彻底拍干微孔。
显色底物避光室温显色 18min,观察标准品颜色梯度。
加入终止液混匀终止反应,酶标仪读取 OD 值,计算植物样本赤霉素含量。
关键字: 植物赤霉素;GA;ELISA试剂盒;
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